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三、影响性腺发育的因素
亲鱼(种鱼)是进行鱼类人工繁殖的物质基础。因此,在整个亲鱼培育过程中要创造良好的条件,满足亲鱼性腺发育所需的生态环境条件,促使亲鱼的发育成熟。
(一)营养条件
亲鱼卵细胞的繁殖和生长,需要大量的营养物质,卵粒中大量的卵黄的积累需要来自机体营养物质的转化。因此,只有当鱼类从外界吸收营养物质超过维持生命及正常生长水平以上时,才能保证性腺的正常发育。
在春季鱼类还没有开始正式生长前,卵母细胞却已经开始发育,此时,鱼类还没有摄食或者还没有大量吃食,故主要是由机体内所储蓄的脂肪转化到性腺中去,进行卵黄物质的积累。因此,平时的喂养要好且要足够。
(二)秋冬两季培育至关重要
在越冬前培育良好的亲鱼,使体内储存大量丰富的脂肪。在越冬后随着性腺的发育,机体各部分脂肪在雌激素的诱导下,通过肝脏合成卵黄前体,然后逐渐转化到性腺中去。当开春后,亲鱼摄食所吸收的营养物质也就循着这个途径直接向性腺中转化。
反之,秋冬时季培育不好的亲鱼,脂肪储存量少,特别是肠系膜上储存的脂肪少,经过越冬使脂肪消耗殆尽,在春季摄食后所吸收的脂肪,不能直接向性腺转化,而是首先储存到肠系膜上,然后才能向性腺转化。这就可能影响到当年的按时生产,就得延迟催产繁育工作。
有人忽视秋冬的培育,只在催产前(春季)重视和强制式的饲喂。但如果鱼腹腔中脂肪没时间转化且储存量过多,这会抑制性腺的发育。因此,秋季和春季的培育是互相联系的,是不可分割的整体,绝不能把它们分割开来,任何忽视秋季培育,单纯强调春季培育的做法都是不科学的,是违反性腺发育规律的做法。
(三)水温
温度对鱼类的性腺发育无疑是具有很大的作用,水温不仅会影响鱼类的性成熟年龄,而且还会影响到鱼类繁殖的时间,许多鱼类从产卵开始,是由产卵前水温的高低所决定的。
鱼类的卵母细胞随着水温的变化而变化,在鱼类生长环境主要因素中,对性腺发育关系最密切的是水温。总之,环境温度对鱼类的繁殖和繁殖能力影响作用是很大的。故鱼类性腺的发育进程不仅取决于饲料营养的好坏,同时也受制于环境水温的高低。
(四)溶解氧
水中溶氧量的多少,不但直接影响到亲鱼的生存,而且影响到亲鱼的性腺发育,在生殖细胞生长过程中,都要从母体的血液中获得氧气,而且随着性腺的发育,生殖细胞的长大,需要溶氧量的不断增加。这和我们孕妇需要呵护一样,不能有任何闪失。
因此,性腺发育越好,怀卵量越多的亲鱼,需氧量就越多,而抗缺氧能力也就愈低。亲鱼塘往往因泛池缺氧而引起窒息,而最先死亡的亲鱼均为性腺发育最好的亲鱼。所以在亲鱼培育中,需要经常开动增氧机,池塘溶氧量不能低于4毫克/升,以保证亲鱼性腺的正常发育,避免因缺氧而死亡亲鱼。较高的溶氧量能促使亲鱼的性腺发育,对后续的发情,产卵等都能起到良好的作用。
(五)冲水刺激
冲水刺激,是和模仿江河流水状态在产卵时加水以刺激亲鱼兴奋一样,是亲鱼性腺发育所需要的重要生态条件之一。繁殖生产经验证明:凡经过冲水培育的亲鱼,催产效果一般都比不冲水的要好,不仅难产的现象减少,而且在产卵量,产卵率和受精率方面均有所提高。
冲水不仅可以改善池塘的水质,提高池塘溶氧量,增进食欲,促进新陈代谢。冲水还可以改善饵料生物的组成,维持为鲢、鳙消化的浮游生物种群所占的优势,提高亲鱼的营养水平。
(六)人为干扰
人为的干扰和刺激都会加速性腺的迟滞不熟或者过熟退化,特别是在水温较高的情况下,退化速度更为明显。比如打网次数多,亲鱼受惊吓的次数就多,使亲鱼的神经过度紧张,导致生理上的不平衡而出现内分泌系统失调,会严重影响亲鱼的正常发育。
四、催产时间
催产时间的主要决定因素是水温,家鱼人工繁殖适宜温度是22~30℃,最适温度为24~28℃。家鱼的催产季节一般在4~6月份,水温稳定在18~20℃五天以上即可催产。一般先进行草鱼、鲢鱼的催产,再进行鳙鱼的催产,最后进行青鱼的催产。
具体催产时间需要根据四大家鱼的各项生理指标综合判定,亲鱼培育后期,随着性腺的渐进成熟,亲鱼食量会开始明显减退甚至不吃东西,说明亲鱼的性腺已经成熟,此时可以通过观察鱼的粪便形状会变小,或者拉网检查亲鱼性腺发育情况,就能基本确定繁殖时机。
五、催产药剂的选择
催产药剂主要为外源激素,通过刺激鱼脑垂体进一步合成释放促卵泡生长激素(FSH),增加鱼体内FSH浓度,可强化体内营养的转化过程,加速性腺的发育进程,促使亲鱼早熟顺产。
目前,鱼类人工繁殖使用的催产药物主要有鱼类脑垂体(PG)、绒毛膜促性腺激素(HCG)和促黄体释放激素类似物系列(LRH-A)三类为主。脑垂体(PG)因采集有一定的限制,现在多用巴胺拮抗物地欧酮(DOM)替代,促黄体释放激素类似物系列(LRH-A)现在分为LRH-A2和LRH-A3两种,另外还有一些混合催产激素种类,比如A型混合激素和B型混合激素。这些催产药剂单独或混合使用都能产生催产效果,此外,还有一些提高催产效果的辅助剂。
(一)鱼类脑垂体(PG)
鱼类脑垂体内含多种激素,对鱼类催产最有效的成分是促性腺激素(GTH),是一种分子量在30万左右的糖蛋白激素。鱼类脑垂体主要利用促性腺激素促使鱼类性腺发育;促进性腺成熟、排卵、产卵或排精;并控制性腺分泌性激素。
在水温较低的催产早期,或亲鱼一年催产两次时,催产效果比绒毛膜促性腺激素好,但是如果使用不当常会出现难产。目前,生产中多使用鲤鱼的脑垂体,可以用地欧酮(DOM)替代。
(二)绒毛膜促性腺激素(HCG)
市售成品的商品名称为鱼用(或兽用)促性腺激素。为白色、灰白色或淡黄色粉末,易溶于水,遇热易失活,使用时现配现用。这种激素催熟作用不及脑垂体和释放激素类似物,对鲢、鳙鱼催产效果与脑垂体相同,催产草鱼时,单独使用效果不佳。
它是从2~4个月的孕妇尿中提取的一种糖蛋白激素,相对分子量质量在36000左右,主要作用是促进亲鱼排卵,也有一定的促性腺发育作用,但它对温度的反应较敏感,且反复使用易产生抗药性。
(三)促黄体释放激素类似物(LRH-A)
市售促黄体素释放激素类似物(LRH-A)为人工合成激素,LRH-A为白色粉末,易溶于水,阳光直射会使其变性,其可直接作用于鱼类脑垂体使其分泌促性腺激素,从而促使卵母细胞发育成熟并排卵。
目前,市售的LRH-A分为鱼用促排卵素2号(LRH-A2)和鱼用促排卵素3号(LRH-A3)。LRH-A对主要养殖鱼类的催熟催产效果都很好,草鱼效果最好;对已催产过几次的鲢、鳙鱼的效果,不及绒毛膜促性腺激素和脑垂体;对鲤、鲫、鲂等鱼类的有效剂量也较草鱼大。它还具有副作用小、可人工合成、药源丰富等优点,现已成为主要的催产剂。
(四)利血平(RES)和地欧酮(DOM)
利血平(RES)和地欧酮(DOM)对垂体GTH的释放和调节起着重要作用。利血平(RES)、地欧酮(DOM)在生产上一般不单独使用,主要与LRH-A混合使用,以进一步增加其活性,从而显著增强LRH-A刺激鱼脑垂体分泌GTH,并诱导排卵。
六、催产剂的注射
注射催产剂主要分为一次注射和二次注射法。青亲鱼催产有时会采用三次注射法,目前多采用二次注射法进行催产,因为两次注射法第一针有催熟的作用,其产卵率、产卵量和受精率都较高,亲鱼发情时间较一致,特别适用于早期催产或亲鱼成熟度不够的情况催产。
在生产中,草鱼通常采用一次注射法,鲢鱼、鳙鱼根据性腺发育情况采用一次或两次注射法,青鱼催产难度较大,应根据性腺发育情况采用两次甚至三次注射法。催产剂注射时,应根据天气、水温和效应时间来确定注射时间。采用一次性注射法时,雄鱼注射剂量为雌鱼的1/2或1/3,与雌鱼同时注射。注射剂量多依使用说明的推荐用量,性腺成熟好的用低剂量,性腺成熟差的用高剂量。
草鱼雌鱼的注射剂量:每公斤体重LRH-A2注射5~10微克,或PG注射4~6毫克(3~5粒)(一般不单独使用),或用LRH-A2注射5~10微克加PG用1~2毫克,或用LRH-A2注射5~10微克加HCG用800~1000国际单位。或者依使用说明的推荐用量。
鲢鱼、鳙鱼雌鱼注射剂量:每公斤体重注射HCG注射800~1500国际单位,或PG注射4~6毫克(一般不单独使用),或LRH-A2注射10~20微克(一般不单独使用),或用HCG注射800~1200国际单位加PG用1~2毫克,或用LRH-A2注射10~15微克加HCG用800~1000国际单位。或者依使用说明的推荐用量。
若采用两次注射时,第一针和第二针的针距时间依水温高低来定,水温越低或亲鱼成熟度越差,注射第二针的间隔时间越长,一般为6-14小时的间距。采用两次注射时,所用催产剂总量与一次性注射相同,第一次注射主要起催熟作用,剂量要严格控制,切不可偏高,否则鱼卵质量较差,第一次注射剂量大约为总量10%左右的催产剂,6~14小时后再注射余下的全部剂量。
催产剂注射前,先对亲鱼称重,再根据需求配制催产剂,催产剂需用生理盐水溶解制成悬浊液后,方能随水注入鱼体。一般选用6~8号针头,5毫升或10毫升的注射器进行注射,所有器具在使用前需煮沸消毒。
注射部位分体腔注射和肌肉注射两种,二者效果相同。体腔注射又分为胸腔注射和腹腔注射两种方式,现在都是以胸腔注射为主,腹腔注射、肌肉注射现在很少使用。胸腔注射是在鱼胸鳍基部的无鳞凹陷处,针头朝鱼体前方与体轴呈45~60度角刺入,深度约1厘米,不宜过深,否则会伤及内脏;腹腔注射是在腹鳍基部注射,注射角度为30~45度,深度为1~2厘米;肌肉注射一般在背鳍下方肌肉丰满处,用针顺着鳞片向前刺入肌肉1~2厘米进行注射。
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